產(chǎn)品名稱：Reverse Tranase
中文名稱：逆轉(zhuǎn)錄酶（反轉(zhuǎn)錄酶）

產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：

產(chǎn)品描述：本制品是通過基因重組技術(shù)克隆表達(dá)M-MuLV的缺失突變型 RNase H-的反轉(zhuǎn)錄酶。一般的嘢生型M-MuLV（Moloney Murine Leukemia Virus）具有以下幾種活性：依賴于RNA的DNA聚合酶活 性；依賴于DNA的DNA聚合酶活性；RNase H活性。由于RNaseH 能夠催化降解 DNA/RNA雜合體中的RNA，因此在cDNA第—條鏈 的合成反應(yīng)中可能會(huì)降解RNA/DNA雜合體中的模板RNA。本酶的 RNase H活性缺失，延伸能力強(qiáng)，可用于較長(zhǎng)的cDNA合成，高比 例的全長(zhǎng)cDNA文庫的構(gòu)建以及Real Time RT-PCR反應(yīng)等。

反轉(zhuǎn)錄酶 產(chǎn)品用途：

1) 1st Strand cDNA的合成；

2) cDNA Probe的制備；

3) RT-PCR反應(yīng)以及Real Time RT-PCR反應(yīng)。

保存溫度：-20℃。

產(chǎn)品反應(yīng) Buffer 中含有高濃度的 DTT，低溫下或者凍融可 能會(huì)導(dǎo)致沉淀析出，請(qǐng)恢復(fù)至室溫并輕搖混勻后使用。

Reverse Tranase 產(chǎn)品包裝（A包裝）：

反轉(zhuǎn)錄酶 質(zhì)量保證：經(jīng)多次柱純化，SDS-PAGE 膠檢測(cè)僅可見清晰單一 目的條帶，PCR 方法檢測(cè)無大腸桿菌 DNA 殘留，無核 酸內(nèi)、外切酶污染，無 RNA 酶污染。

反轉(zhuǎn)錄酶 活性定義：以Poly(rA)?Oligo（dT）為模板/引物，在37℃、10 分鐘條件下，摻入1 nmol的[3H] dTTP所需要的酶量定 義為1個(gè)活性單位。

逆轉(zhuǎn)錄酶 操作方法與常用PCR循環(huán)：

使用Reverse Tranase 注意事項(xiàng)：

1） 用DEPC處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材，或者 購買已經(jīng)證明無核酸酶的實(shí)驗(yàn)用具，實(shí)驗(yàn)過程戴手套 并經(jīng)常更換手套，避免RNA酶的污染。

2） 確保所用試劑及超純水中無RNA酶污染。

3） 純化過的RNA必須保證不含有鹽，金屬離子， 乙醇和苯酚，以上成分會(huì)干擾第—鏈cDNA的合成反 應(yīng)?？刹捎靡掖汲恋鞷NA的方法去除掉痕量污染物。

4） 為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的有效進(jìn)行，需使用高質(zhì)量 的RNA模板。