產(chǎn)品展示PRODUCTS
2×Fast Pfu Ma-ster Mix 1ml 環(huán)凱微生物
更新時(shí)間:2024-07-08
訪問量:672
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
生產(chǎn)地址:廣東環(huán)凱微生物
產(chǎn)品名稱:2×Fast Pfu Master Mix
中文名稱:2倍快速Pfu梅預(yù)混液
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:
編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 產(chǎn)品價(jià)格 |
HKE035-01A | 2×Fast Pfu Master Mix | 1ml | 2倍快速Pfu梅預(yù)混液 |
產(chǎn)品描述:本制品是將PCR反應(yīng)所需的Fast Pfu梅、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖夜以及優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑,預(yù)先配制成2倍濃度的混合物。2×Fast Pfu Master Mix專為擴(kuò)增克龍DNA片段優(yōu)化,高保真,錯(cuò)誤率僅為1.3×10-6。使用時(shí)只需在加入模板和引物并稀釋到1倍濃度即可進(jìn)行PCR反應(yīng),非常方便。較普通Pfu梅,2×Fast Pfu Master Mix具有快速、高靈敏度、抗干擾強(qiáng)等特點(diǎn),能獲得更理想的擴(kuò)增結(jié)果, 并大幅度縮短擴(kuò)增反應(yīng)時(shí)間,非常適用于1-20kb長(zhǎng)片段的擴(kuò)增。
產(chǎn)品特點(diǎn):
高保真:具有同Pfu梅相同的保真度,為普通Taq酶的50倍。
靈敏:可從0.05ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出特定基因片段。
快速高效:Fast Pfu擴(kuò)增速度為普通Pfu梅的數(shù)倍,72℃保溫30 秒可延伸1kb以上,可在較短時(shí)間內(nèi)獲得高產(chǎn)量的PCR產(chǎn)物(圖例一)。
快捷:PCR反應(yīng)所必需試劑全集于一管之中,數(shù)分鐘即可完成反應(yīng)體系配制。
產(chǎn)品用途:用于要求保真度比較高,擴(kuò)增長(zhǎng)度較長(zhǎng)的PCR反應(yīng),包括克龍PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成等。
使用建議:(Fast Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端,無(wú)3′端"A" 突出,除使用環(huán)凱PCR一步定向克龍?jiān)噭┖校–at. No: HKNR001) 外,其它PCR產(chǎn)物的克龍方案有:)
1)PCR前引物進(jìn)行5′端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物麟酸化處理后再直接克龍于平滑末端的載體中。
2)將產(chǎn)物3′末端加A后再與T載體連接。
3)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對(duì)活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加引物的長(zhǎng)度, 理想的引物長(zhǎng)度為20-30mers。另外為了減少由3′→5′外切酶活性引起的引物降解,盡量在冰上配制反應(yīng)體系。
應(yīng)用實(shí)例:圖例一)50μL 擴(kuò)增體系中,λDNA 為模板, 擴(kuò)增 1kb~20kb 片段。
泳道 M:λ/Hind III DNAMarker;
泳道 1:1kb;
泳道 2:2kb;
泳 道 3:4kb;
泳 道 4:6kb;
泳道 5:8kb;
泳道 6:10kb;
泳道 7:12kb;
泳道 8:20kb。
保存溫度:-20℃。
產(chǎn)品包裝(A 包裝):
質(zhì)量保證:經(jīng)檢測(cè)無(wú)外源核酸酶殘留;qPCR方法檢測(cè)無(wú)大腸桿菌DNA殘留;能有效擴(kuò)增人基因組中的單拷貝基因。
常用反應(yīng)體系(50μL):
常用PCR 循環(huán):
注意事項(xiàng):
1)需溶解*后使用,防止離子濃度不均勻。
2)對(duì)高GC含量模板,建議將變性溫度提高到98℃。
3)對(duì)于高GC模板,建議配套使用PCR萬(wàn)-能增強(qiáng)劑 I(Cat.No: HKE055)或者添加終濃度為5%-8% DMSO。