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主營(yíng)產(chǎn)品:不銹鋼過(guò)濾系統(tǒng),紅外線接種環(huán)滅菌器,浮游菌采樣器,脈沖震蕩樣品前處理器,數(shù)字化智能電熱鼓風(fēng)干燥箱,數(shù)字化智能電熱恒溫培養(yǎng)箱,實(shí)驗(yàn)室設(shè)備及環(huán)境溫濕度監(jiān)測(cè)系統(tǒng),潔凈工作臺(tái)等實(shí)驗(yàn)設(shè)儀器設(shè)備。

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Fast Pfu DNA Polymerase 250U

Fast Pfu DNA Polymerase 250U

更新時(shí)間:2024-07-08

訪問(wèn)量:778

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

生產(chǎn)地址:廣東環(huán)凱微生物

簡(jiǎn)要描述:
Fast Pfu DNA Polymerase 250U用于用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng)

產(chǎn)品名稱:Fast Pfu DNA Polymerase
中文名稱:快速Pfu DNA聚合酶

產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:

編號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格產(chǎn)品介紹產(chǎn)品價(jià)格
HKE031-02AFast Pfu DNA Polymerase250U快速Pfu DNA聚合酶


產(chǎn)品描述:本制品是通過(guò)采用分子進(jìn)化技術(shù)對(duì)普通Pfu梅進(jìn)行改造而獲得的 新型Fast Pfu梅,是新一代的高保真DNA聚合酶。該酶解決了高保真PCR反應(yīng)中Pfu梅擴(kuò)增靈敏度低、延伸速度緩慢的難題,能夠高效、快速擴(kuò)增≤6kb片段目的基因片段(樶長(zhǎng)可達(dá)20kb),模板低至0.05ng, 并且在DNA末端補(bǔ)平、全基因合成、引入突變等之中有著很好的應(yīng)用。

產(chǎn)品特點(diǎn):

高保真:保真度高于Pfu梅,為普通Taq酶的50倍。

快速高效:Fast Pfu擴(kuò)增速度為普通Pfu梅的數(shù)倍,72℃保溫30秒可延伸1kb以上。擴(kuò)增長(zhǎng)度可達(dá)20kb,能高效擴(kuò)增≤6kb片段。

高靈敏:可從0.05ng人基因組DNA模板中擴(kuò)增出1.2kb特定基因片段,擴(kuò)增性能顯著優(yōu)于普通Pfu梅。

*配方的 5×Buffer:使PCR 擴(kuò)增反應(yīng)更加穩(wěn)定、靈敏、高效。

產(chǎn)品用途:用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng),包括克龍PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成、DNA末端補(bǔ)平等,也用于復(fù)雜模板, 高GC/AT 模板的擴(kuò)增。

使用建議:(Fast Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平末端,無(wú)3′端"A"突出, 除使用環(huán)凱PCR一步定向克龍?jiān)噭┖校–at. No: HKNR001)外, 其它PCR 產(chǎn)物的克龍方案有:)

1)PCR前引物進(jìn)行5′端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物麟酸化處理后再直接克龍于平末端的載體中。

2)將產(chǎn)物3′末端加A后再與T載體連接。

3)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校對(duì)活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加引物的長(zhǎng)度,理想的引物長(zhǎng)度為20~30mers。另外為了減少由3′→5′外切酶活性引起的引物降解,盡量在冰上配制反應(yīng)體系,并樶后加入Fast Pfu DNA聚合酶。

應(yīng)用實(shí)例:圖例一)50μL 擴(kuò)增體系中,λDNA 為模板,擴(kuò)增 1kb~20kb 片段。

泳道 M:λ/Hind III DNA Marker;

泳道 1:1kb;

泳道 2:2kb;

泳道 3:4kb;

泳道 4:6kb;

泳道 5:8kb;

泳道 6:10kb;

泳道7:12kb;

泳道 8:20kb

保存溫度:-20℃。

產(chǎn)品包裝(A 包裝):

活性定義:在74℃條件下,30 分鐘內(nèi)催化 10nmol dNTPs 摻入反應(yīng)成為酸不溶性物質(zhì)所需的酶量為一個(gè)單位。。

常用反應(yīng)體系(50μL):

常用PCR 循環(huán):

注意事項(xiàng):

1)對(duì)高 GC 含量模板,建議將變性溫度提高到 98℃。

2)對(duì)于高 GC 模板,建議配套使用 PCR 增強(qiáng)劑 I(Cat. No: HKE050)和 PCR 增強(qiáng)劑 II(Cat. No: HKE051),或者添加終濃度為 5%-8% DMSO。


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