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主營(yíng)產(chǎn)品:不銹鋼過(guò)濾系統(tǒng),紅外線接種環(huán)滅菌器,浮游菌采樣器,脈沖震蕩樣品前處理器,數(shù)字化智能電熱鼓風(fēng)干燥箱,數(shù)字化智能電熱恒溫培養(yǎng)箱,實(shí)驗(yàn)室設(shè)備及環(huán)境溫濕度監(jiān)測(cè)系統(tǒng),潔凈工作臺(tái)等實(shí)驗(yàn)設(shè)儀器設(shè)備。
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    脈沖式均質(zhì)器在食品微生物快速檢測(cè)中應(yīng)用研究

    發(fā)布時(shí)間: 2013-11-14  點(diǎn)擊次數(shù): 1969次

             脈沖式均質(zhì)器在食品微生物快速檢測(cè)中應(yīng)用研究

       隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,人民對(duì)食品安全性的要求也日益提高,如何更快更好的檢測(cè)出食品能否放心食用就顯得尤為重要。微生物指標(biāo)是食品檢測(cè)中一個(gè)重要的指標(biāo),而傳統(tǒng)的檢測(cè)方法操作準(zhǔn)備繁瑣且樣品前處理帶有一定的缺陷和局限性。為了提高檢測(cè)效率,微生物檢測(cè)可使用快速檢測(cè)方法。現(xiàn)行上常用的快速檢測(cè)方法為使用快速測(cè)試片。由于測(cè)試片上含有冷水可溶性凝膠,因此無(wú)需傳統(tǒng)方法中傾倒瓊脂的步驟,從而避免了對(duì)細(xì)菌可能造成的熱損傷。相對(duì)于傳統(tǒng)平板檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便、結(jié)果穩(wěn)定,具有良好的實(shí)用性能,可大大簡(jiǎn)化操作程序,提高檢測(cè)速度[1]。為了快速檢測(cè)方法能更好的開(kāi)展,選擇適宜的樣品前處理的均質(zhì)方式可使檢測(cè)數(shù)據(jù)更真實(shí)可靠。本文通過(guò)研究新式的脈沖式均質(zhì)器與傳統(tǒng)的拍打式、旋轉(zhuǎn)攪拌式在使用效果上的差異,以得出使用脈沖式均質(zhì)器在食品微生物快速檢測(cè)中更優(yōu)的結(jié)論。

      一.材料

    (1) 試驗(yàn)材料

      美國(guó)3M公司細(xì)菌總數(shù)測(cè)試片,美國(guó)3M公司酵母菌/霉菌測(cè)試片,檢測(cè)樣品來(lái)源于市場(chǎng)隨機(jī)購(gòu)買。

    (2) 主要培養(yǎng)基

    平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基、孟加拉紅培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)瓊脂、Baird-Parker 瓊脂基礎(chǔ)、亞硫酸鉍(BS)瓊脂。以上培養(yǎng)基均由廣東環(huán)凱微生物科技有限公司提供。

    (3) 主要儀器設(shè)備

    ShockMixer-1 脈沖式樣品前處理器(環(huán)凱制造)、拍打式均質(zhì)器、攪拌式均質(zhì)器、振蕩器、高壓蒸氣滅菌鍋、超凈工作臺(tái)、電子天平、移液槍、生化培養(yǎng)箱。

    (4) 菌株

    大 腸 埃 希 菌 [CMCC(B)44102] 、金黃色葡萄球菌[CMCC26003]、福氏志賀氏菌[CMCC(B)51572]、乙型副傷寒沙門氏菌[CMCC51572]。以上菌種均由廣東環(huán)凱微生物科技有限公司提供。

    (5) 脈沖式均質(zhì)器的工作原理

    通過(guò)高頻率震動(dòng)內(nèi)裝食品樣品的膠袋,產(chǎn)生強(qiáng)烈沖擊波與高速攪動(dòng)聯(lián)合作用,將食品中的微生物驅(qū)趕到樣品懸液中,形成菌濃度均勻的樣品稀釋液。減輕了對(duì)樣品的破壞,從而極大地減少了樣品碎片的產(chǎn)生。食品樣液澄清度高,能與快速檢測(cè)方法更配套。

     二.試驗(yàn)方法

    1.平板法

       脈沖式均質(zhì)器的操作步驟為,取一無(wú)菌袋打開(kāi)置于天平上稱取25 g樣品,倒入所需225 mL無(wú)菌生理鹽水,置于脈沖均質(zhì)器的振蕩環(huán)中,脈沖時(shí)間設(shè)30 s,運(yùn)行均質(zhì)。再分別依照GB/T4789.2-2010 , GB4789.4-2010 , GB/T4789.10-2010 ,GB/T4789.15-2010,GB/T4789.5-2003進(jìn)行。

    2.快速測(cè)試法

    22.1 細(xì)菌總數(shù)快速測(cè)試片法

    (1)利用脈沖均質(zhì)器把樣品制成1∶10的樣品勻液,按樣品的特性再進(jìn)一步稀釋為1∶100,1∶1000等濃度的供試液。

    (2)在平坦的實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面解開(kāi)測(cè)試片的上層膜,用移液槍吸取1 mL樣品供試液,垂直滴加在測(cè)試片的中央。把上層膜蓋下或直接落下,但不可滾動(dòng)上層膜。使用壓板隆起面底朝下,放置在上層膜中央,輕輕地壓下,使樣液均勻覆蓋于圓形的培養(yǎng)面積上,切勿扭轉(zhuǎn)壓板。拿起壓板,靜置至少1 min以使培養(yǎng)基凝固。每個(gè)

    樣品做2個(gè)平行試驗(yàn)。

    (3)測(cè)試片的透明面朝上,可堆疊至20片,水平置于培養(yǎng)箱內(nèi)

    36±1 ℃培養(yǎng)48±2 h。

    2.2.2 酵母菌霉菌快速測(cè)試片法

    (1)樣品前處理同2.2.1(1)。

    (2)測(cè)試片使用方法同2.2.1(2)。

    (3)將測(cè)試片的透明面朝上,水平置于培養(yǎng)箱內(nèi)21~25 ℃培養(yǎng)3~5 d。

    3 結(jié)果與討論

    3.1 脈沖式均質(zhì)器對(duì)微生物的殺滅影響用現(xiàn)行國(guó)標(biāo)平板計(jì)數(shù)法分別檢測(cè)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌的菌懸液。把各一定濃度的菌懸液分別以15 s、30 s、60 s、180 s 的脈沖時(shí)間處理,檢測(cè)脈沖波處理是否會(huì)對(duì)微生物生存造成不利影響,結(jié)果見(jiàn)表1。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)脈沖處理不影響大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、福氏志賀氏菌、乙型副傷寒沙門氏菌的生存,不對(duì)其構(gòu)成殺滅作用。

    表1 脈沖前處理對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株生存的影響

     

    3.2 比較試驗(yàn)

    對(duì)市場(chǎng)上隨機(jī)購(gòu)買的5個(gè)樣品分別采用脈沖式均質(zhì)器、拍打式均質(zhì)器與旋轉(zhuǎn)攪拌式均質(zhì)器進(jìn)行前處理后利用微生物快速測(cè)試片,對(duì)檢品的菌落總數(shù)和霉菌進(jìn)行快檢。同時(shí)用脈沖法前處理后的樣液做國(guó)標(biāo)的平板法,結(jié)果見(jiàn)表2。從表中可看出脈沖式前處理后,使用快速測(cè)試紙片法測(cè)菌落總數(shù)與霉菌的結(jié)果,與用脈沖式

    前處理后用傳統(tǒng)的國(guó)標(biāo)平板法得出的數(shù)據(jù)相同,說(shuō)明使用食品快速測(cè)試紙片測(cè)定菌落總數(shù)與霉菌的結(jié)果是可信的。而對(duì)比脈沖式、拍打式和旋轉(zhuǎn)攪拌式前處理的數(shù)據(jù),可說(shuō)明脈沖式的均質(zhì)效果更好,檢測(cè)數(shù)據(jù)更接近實(shí)際菌數(shù)。

     

    4 結(jié)論

    在市面上流通的食品,大部分都屬于快速消費(fèi)品,因此提高此類快消品的微生物檢測(cè)速度和準(zhǔn)確度,對(duì)有效的保證食用人群的身體健康具有重要的意義。在微生物快速檢測(cè)中,采用快速測(cè)試片是常用的方法。此方法具有顯著的優(yōu)點(diǎn):

    *:減少培養(yǎng)基配制工作,可及時(shí)檢測(cè),縮短準(zhǔn)備時(shí)間。

    第二:在取樣時(shí)同時(shí)接種,結(jié)果更能反映當(dāng)時(shí)樣本中真實(shí)的細(xì)菌數(shù)。

    第三:不需要大量的玻璃器皿,操作簡(jiǎn)便;易于保存,便于運(yùn)輸,工作量小。

    避免了熱瓊脂法不適宜受損細(xì)菌恢復(fù)的缺陷。在食品的微生物快速檢測(cè)中,樣品前處理的好壞會(huì)影響快速檢測(cè)的準(zhǔn)確度?,F(xiàn)時(shí)上比較新式的方法是使用脈沖式均質(zhì)器。這種方法優(yōu)于目前國(guó)內(nèi)普遍使用的拍打式和旋轉(zhuǎn)攪拌式均質(zhì)器。脈沖式前處理對(duì)食品中微生物無(wú)殺滅作用,通過(guò)與國(guó)標(biāo)方法對(duì)比,證實(shí)檢測(cè)效果良好,可以應(yīng)用于微生物快速檢驗(yàn)工作中。脈沖式均質(zhì)器的優(yōu)點(diǎn)有:

    *,減少食品碎片的產(chǎn)生,zui大限度地減少對(duì)一些快速檢驗(yàn)方法的干擾因素。

    第二,無(wú)需打碎樣品,不會(huì)導(dǎo)致樣品處理袋的破裂。

    第三,樣品碎片較少,樣品液澄清,易于取樣,易于過(guò)濾,節(jié)省時(shí)間。

    第四,的樣品處理方法微生物的釋放效果等同甚至優(yōu)于其他方法。世界上已有一些國(guó)家或組織批準(zhǔn)了這種方法,如標(biāo)準(zhǔn)化組織在《ISO7218:2007食品與飼料中微生物微生物學(xué)檢驗(yàn)總的要求與指導(dǎo)》第三版5.4中,把脈沖均質(zhì)法列為三種儀器樣品均質(zhì)前處理方法之一[2]。因此,在微生物快速檢測(cè)中,使用脈沖式均質(zhì)器均質(zhì)可提高工作效率和減少檢測(cè)的干擾性,應(yīng)大力推廣應(yīng)用于食品微生物快速檢測(cè)前處理中。

     

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